實驗原理：細菌的鞭毛極細，直徑一般為10—20nm，只有用電子顯微鏡才能觀察到。但是，如采用特殊的染色法，則在普通光學顯微鏡下也能看到它。鞭毛染色方法很多，但其基本原理相同，即在染色前先用媒染劑處理，讓它沉積在鞭毛上，使鞭毛直徑加粗，然后再進行染色。常用的媒染劑由丹寧酸和氯化高鐵或鉀明礬等配制而成。現(xiàn)推薦以下兩種染色法。實驗方法

1.鍍銀法染色

（1）清洗玻片  選擇光滑無裂痕的玻片，選用新的。為了避免玻片相互重疊，應將玻片插在金屬架上，然后將玻片置洗衣粉過濾液中（洗衣粉煮沸后用濾紙過濾，以除去粗顆粒），煮沸20min。取出稍冷后用自來水沖洗、晾干，再放入濃洗液中浸泡5—6天，使用前取出玻片，用自來水沖去殘酸，再用蒸餾水洗。將水瀝干后，放入95%乙醇中脫水。

（2）菌液的制備及制片：菌齡較老的細菌容易失落鞭毛，所以在染色前應將待染細菌在新配制的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基斜面上（培養(yǎng)基表面濕潤，斜面基部含有冷凝水）連續(xù)移接3-5代，以增強細菌的運動力。zui后一代菌種放恒溫箱中培養(yǎng)12—16h。然后，用接種環(huán)挑取斜面與冷凝水交接處的菌液數(shù)環(huán)，移至盛有1—2mL無菌水的試管中，使菌液呈輕度混濁。將該試管放在37℃恒溫箱中靜置10min（放置時間不宜太長，否則鞭毛會脫落），讓幼齡菌的鞭毛松展開。然后，吸取少量菌液滴在潔凈玻片的一端，立即將玻片傾斜，使菌液緩慢地流向另一端，用吸水紙吸去多余的菌液。涂片放空氣中自然干燥。

用于鞭毛染色的菌體也可用半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)。方法是將0.3-0.4%的瓊脂肉膏培養(yǎng)基熔化后倒入無菌平皿中，待凝固后在平板中央點接活化了3-4代的細菌，恒溫培養(yǎng)12-16h后，取擴散菌落的邊緣制作涂片。

（3）染色

①滴加A液，染4—6min。

②用蒸餾水充分洗凈A液。

③用B液沖去殘水，再加B液于玻片上，在酒精燈火焰上加熱至冒氣，約維持0.5—1min（加熱時應隨時補充蒸發(fā)掉的染料，不可使玻片出現(xiàn)干涸區(qū)）。

④用蒸餾水洗，自然干燥。

（4）鏡檢：先低倍，再高倍，zui后用油鏡檢查。

結果：菌體呈深褐色，鞭毛呈淺褐色。

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