酸化血清溶血試驗(yàn)技術(shù)分析

更新時(shí)間：2013-04-01　點(diǎn)擊量：3175

實(shí)驗(yàn)原理

　　陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH）患者的紅細(xì)胞由于膜的缺陷，對(duì)補(bǔ)體的敏感性增加，這些對(duì)補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞能被正常血清所溶解，特別在血清酸性條件下（pH6.4-6.5）經(jīng)37℃孵育，溶血更明顯。

實(shí)驗(yàn)方法

　　材料：

　　1.0.25mol/LHCL

　　2.0.85%生理鹽水

　　3.離心機(jī) 、試管、水浴箱等

　　方法：

　　1.取靜脈血2-3ml，取下針頭，將血輕輕注入試管中；

　　2.離心吸出血清備用；

　　3.將血塊搗碎，用生理鹽水洗滌3次，配成50%紅細(xì)胞懸液備用；

　　4.按下表進(jìn)行操作；

待測(cè)管（ml）	對(duì)照管（ml）
0.5	/
0.025	0.025
/	0.5
0.05	0.05

　　5.兩管均加塞，置37℃水浴箱中1h后直接觀察或者離心后觀察結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

　　溶血為陽(yáng)性，不溶血為陰性

注意事項(xiàng)

　　1.本實(shí)驗(yàn)不用抗凝血，因抗凝劑會(huì)阻礙溶血，降低敏感性，出現(xiàn)假陰性；

　　2.血清酸化后立即塞緊管口，以防二氧化碳逸出；

　　3.血清需新鮮，以免補(bǔ)體失活，造成假陰性；

　　4.實(shí)驗(yàn)用具要干燥，針頭要粗，紅細(xì)胞懸液要直接滴入液體，不要沿管壁流下，以免溶血。

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